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使用ELISA檢測(cè)試劑盒時(shí)需要遵守的問題有很多?

更新時(shí)間:2022-09-19      點(diǎn)擊次數(shù):985
  ELISA檢測(cè)試劑盒可實(shí)現(xiàn)多種分泌性蛋白(細(xì)胞因子、趨化因子、生長(zhǎng)因子等)的同時(shí)檢測(cè)和定量,對(duì)于生物系統(tǒng)的綜合研究而言具有寶貴價(jià)值。不但具有更優(yōu)的效率、速度和檢測(cè)范圍。采用多重檢測(cè)能降低每個(gè)靶標(biāo)結(jié)果的成本。
  ELISA檢測(cè)試劑盒的作用原理:
  1. 抗原或抗體能以物理性地吸附于固相載體表面,或是蛋白和聚苯乙烯表面間的疏水性部分相互吸附,并保持其免疫學(xué)活性;
  2. 抗原或抗體可通過共價(jià)鍵與酶連接形成酶結(jié)合物,而此種酶結(jié)合物仍能保持其免疫學(xué)和酶學(xué)活性;
  3. 酶結(jié)合物與相應(yīng)抗原或抗體結(jié)合后,可根據(jù)加入底物的顏色反應(yīng)來判定是否有免疫反應(yīng)的存在,而且顏色反應(yīng)的深淺是與標(biāo)本中相應(yīng)抗原或抗體的量成正比例的,因此,可以按底物顯色的程度顯示試驗(yàn)結(jié)果。
  ELISA檢測(cè)試劑盒使用注意事項(xiàng):
  1.試劑的選擇:選擇優(yōu)良試劑大家都是知道的,但是在檢測(cè)之前還應(yīng)該提前半個(gè)小時(shí)將試劑拿到常溫下進(jìn)行解凍。
  2.顯色問題: 使用了過期的顯色劑或者是顯色劑用過后放置時(shí)間太長(zhǎng),都有可能造成顯色劑不顯色。所以在進(jìn)行顯色反應(yīng)的時(shí)候,要先查看顯色劑本身的情況。
  3.加樣中可能遇到的問題:在做血清或是血漿用于檢測(cè)試劑的時(shí)候,會(huì)碰到血清血漿不好分離的情況,這個(gè)時(shí)候的解決辦法是先放在常溫中1到2小時(shí),然后在進(jìn)行離心處理。
  4.洗板時(shí)容易造成誤差: 因?yàn)橄窗迨侨斯は吹?,所以判斷什么時(shí)候洗干凈了也是人為判斷的,這個(gè)時(shí)候帶有主觀色彩,所以多清洗幾次,還有就是在洗的時(shí)候孔與孔之間的液體容易交叉流動(dòng)。
  5.終止反應(yīng):在加終止劑的時(shí)候由于傾倒速度快,差生氣泡,造成假陽性結(jié)果。所以在倒終止劑的時(shí)候要緩慢倒。
  6.讀板:讀板的時(shí)候首先應(yīng)該保證板的清潔干凈。
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