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當(dāng)前位置:首頁產(chǎn)品中心科研試劑盒PCR試劑盒50T單增李斯特菌(LM)核酸檢測試劑盒熒光PCR法
單增李斯特菌(LM)核酸檢測試劑盒熒光PCR法

產(chǎn)品簡介

單增李斯特菌(LM)核酸檢測試劑盒熒光PCR法適用于檢測氣管分泌物拭子、肺組織等樣本中的單增李斯特菌,用于單增李斯特菌感染
的輔助診斷,其檢測結(jié)果僅供參考。

產(chǎn)品型號:50T
更新時間:2025-06-17
廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
訪問量:685
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單增李斯特菌(LM)核酸檢測試劑盒熒光PCR法

【產(chǎn)品名稱】

通用名稱:單增李斯特菌(LM)核酸檢測試劑盒熒光PCR法

Name:Listeria monocytogenes (LM) nucleic acid detection kit fluorescence PCR method

【包裝規(guī)格】50T/盒

【預(yù)期用途】

本試劑盒適用于檢測氣管分泌物拭子、肺組織等樣本中的單增李斯特菌,用于單增李斯特菌感染

的輔助診斷,其檢測結(jié)果僅供參考。

【檢驗原理】

本試劑盒采用 TaqMan 探針法實時熒光 PCR 技術(shù),設(shè)計一對單增李斯特菌特異性引物,結(jié)合一條特異

性探針,用熒光 PCR 技術(shù)對單增李斯特菌的 DNA 進行體外擴增檢測,用于臨床上對可疑感染者的病原學(xué)

診斷。

【試劑組成】

名 稱

50T/盒

反應(yīng)液

500μL×2 管

酶液

50μL×1 管

陽性質(zhì)控品

50μL ×1 管

陰性質(zhì)控品

250μL ×1 管

說明:不同批號的試劑盒組分不可交互使用。

【儲存條件及有效期】

-20℃±5℃,避光保存、運輸、反復(fù)凍融次數(shù)不超過 5 次,有效期 12 個月。

【適用儀器】

ABI 、安捷倫 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等系列熒光定量 PCR 檢測儀。


單核細胞增生李斯特氏菌(Listeria monocytogenes)簡稱單增李斯特菌,是一種人畜共患病的病原菌。它能引起人畜的李氏菌的病,感染后主要表現(xiàn)為敗血癥腦膜炎和單核細胞增多。它廣泛存在于自然界中,食品中存在的單增李氏菌對人類的安全具有危險,該菌在4℃的環(huán)境中仍可生長繁殖,是冷藏食品威脅人類健康的主要病原菌之一,因此,在食品衛(wèi)生微生物檢驗中,必須加以重視。

 

PCR技術(shù),即聚合酶鏈反應(yīng)(polymerase chain reaction,PCR)是由美國PE Cetus公司的Kary Mullis在1983年(1993年獲諾貝爾化學(xué)獎)建立的。這項技術(shù)可在試管內(nèi)的經(jīng)數(shù)小時反應(yīng)就將特定的DNA片段擴增數(shù)百萬倍,這種迅速獲取大量單一核酸片段的技術(shù)在分子生物學(xué)研究中具有舉足輕重的意義,極大地推動了生命科學(xué)的研究進展。它不僅是DNA分析常用的技術(shù),而且在DNA重組與表達、基因結(jié)構(gòu)分析和功能檢測中具有重要的應(yīng)用價值。

PCR可以被認為是與發(fā)生在細胞內(nèi)的DNA復(fù)制過程相似的技術(shù),其結(jié)果都是以原來的DNA為模板產(chǎn)生新的互補DNA片段。細胞中DNA的復(fù)制是一個非常復(fù)雜的過程。參與復(fù)制的有多種因素。PCR是在試管中進行的DNA復(fù)制反應(yīng),基本原理與細胞內(nèi)DNA復(fù)制相似,但反應(yīng)體系相對較簡單。

PCR由變性--退火--延伸三個基本反應(yīng)步驟構(gòu)成:①模板DNA的變性:模板DNA經(jīng)加熱至94℃左右一定時間后,使模板DNA雙鏈或經(jīng)PCR擴增形成的雙鏈DNA解離,使之成為單鏈,以便它與引物結(jié)合,為下輪反應(yīng)做準備;

②模板DNA與引物的退火(復(fù)性):模板DNA經(jīng)加熱變性成單鏈后,溫度降至55℃左右,引物與模板DNA單鏈的互補序列配對結(jié)合;

③引物的延伸:DNA模板--引物結(jié)合物在Taq酶的作用下,以dNTP為反應(yīng)原料,靶序列為模板,按堿基配對與半保留復(fù)制原理,合成一條新的與模板DNA 鏈互補的半保留復(fù)制鏈。

重復(fù)循環(huán)變性--退火--延伸三過程,就可獲得更多的“半保留復(fù)制鏈",而且這種新鏈又可成為下次循環(huán)的模板。每完成一個循環(huán)需2~4分鐘, 2~3小時就能將待擴目的基因擴增放大幾百萬倍。

 

【注意事項】

1.所有操作嚴格按照說明書進行;

2.試劑盒內(nèi)各種組分使用前應(yīng)自然融化,*混勻并短暫離心;

3.反應(yīng)液應(yīng)避光保存;

4.反應(yīng)中盡量避免氣泡存在,管蓋需蓋緊;

5.使用一次性吸頭、一次性手套和各區(qū)專用工作服;

6.樣本處理、試劑配制、加樣需在不同區(qū)進行,以免交叉污染; 

7.實驗完畢后用 10%次氯酸或 75%酒精或紫外燈處理工作臺和移液器;

8.試劑盒里所有物品應(yīng)視為污染物對待,并按照《微生物生物醫(yī)學(xué)實驗室生物安全通則》進行處理。


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