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HCEC人角膜上皮細(xì)胞

產(chǎn)品簡介

HCEC人角膜上皮細(xì)胞別名:人角膜上皮細(xì)胞,HCEC細(xì)胞,來源:角膜;上皮細(xì)胞。

產(chǎn)品型號(hào):復(fù)蘇/凍存
更新時(shí)間:2024-06-29
廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
訪問量:1024
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HCEC人角膜上皮細(xì)胞


簡稱:HCEC


中文名:人角膜上皮細(xì)胞


別名:人角膜上皮細(xì)胞,HCEC細(xì)胞


種屬:人


來源:角膜;上皮細(xì)胞


培養(yǎng)條件:DMEM


培養(yǎng)環(huán)境:air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%


狀態(tài):貼壁


NOTE: FOR RESEARCH USE ONLY.


細(xì)胞培養(yǎng)操作步驟:

1. 吸走多余培養(yǎng)基,加入3-5mL PBS后輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶潤洗細(xì)胞;

2. 吸干凈PBS后

加入1mL 0.25%胰-酶-0.53mM EDTA,輕輕搖晃培養(yǎng)皿使胰-酶浸沒細(xì)胞表面,培養(yǎng)瓶放37度培養(yǎng)箱消化;

(細(xì)胞對于消化比較敏感,消化過度會(huì)嚴(yán)重影響細(xì)胞狀態(tài),導(dǎo)致細(xì)胞傳代死亡漂浮或者傳代后不長。細(xì)胞消化到細(xì)胞間隙變大但未脫落,可以輕輕吹下時(shí)即可終止,禁止消化到細(xì)胞*漂浮?;靹蚣?xì)胞時(shí)盡量輕柔,不要吹出大量氣泡。)

3. 加入6-8ml*培養(yǎng)基終止消化,輕輕吹下細(xì)胞混勻;

4. 將混勻的細(xì)胞1000rpm(約150g)離心3min,棄上清,再用新鮮培養(yǎng)基重懸37度培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng);

傳代比例: 不同細(xì)胞生長速度不一,具體傳代比例視細(xì)胞生長速度而定,大部分細(xì)胞適用1:3-1:4傳代,生長較慢的細(xì)胞可以1:2傳代。


Cell cryopreservation

1.凍存液:92%*培養(yǎng)基+8%DMSO(可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)室條件自行選擇)

2.降溫步驟:4度10min,-20度2h,-80過夜后液氮保存。


凍存方法:

1.消化并離心獲得細(xì)胞沉淀后,加配置好的凍存液輕輕重懸細(xì)胞;
2.將細(xì)胞懸液盡快移入已經(jīng)做好標(biāo)記的凍存管;
3.將凍存管轉(zhuǎn)入程序凍存盒,放入-80度冰箱過夜,第二天轉(zhuǎn)入液氮保存;沒有程序凍存盒的實(shí)驗(yàn)室,加入細(xì)胞后可以將凍存管放在泡沫盒中4度靜置5-10min,再-20度靜置2h后轉(zhuǎn)入-80度過夜,第二天轉(zhuǎn)入液氮保存。



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